DPPP (Diphenyl-1-pyrenylphosphine)二苯基-1-芘基膦

（膜特異性的脂質過氧化探針）

產品關鍵詞：

DPPP 二苯基-1-芘基膦；lipid peroxidation 脂質過氧化；lipid hydroperoxides 脂質氫過氧化物；MeLOOH；Methyl Linoleate亞油suan甲酯；CAS NO：110231-30-6；

產品信息

產品描述

二苯基-1-芘基膦（Diphenyl-1-pyrenylphosphine,DPPP）是一種熒光探針，主要用來檢測脂質過氧化。DPPP自身基本無熒光，一旦以化學計量的方式與脂質氫過氧化物反應生成強熒光分子-二苯基-1-芘基膦氧化物（DPPP-O）（最大激發波長~351nm，最大發射波長~380nm）(見圖1)。DPPP的疏水特性使其輕易插入細胞膜和脂質體，是一款優秀的工具用來研究膜特異性的脂質過氧化。DPPP還能用作一種熒光探針，監測低密度脂蛋白（LDL）和細胞氧化水平。

圖1.反應機理（來自文獻）：Okimotoa Y, Watanabea A, Nikia E, Yamashitab T, Noguchia N. A novel fluorescent probe diphenyl-1-pyrenylphosphine to follow lipid peroxidation in cell membranes. FEBS Lett. 2000 Jun 2;474(2-3):137-40. doi: 10.1016/s0014-5793(00)01587-8. PMID: 10838073.

產品特性

1） CAS NO：110231-30-6

2） 同義名：DPPP; 1-(Diphenylphosphino)pyrene;二苯基(芘-1-基)膦；

3） 分子式：C28H19P

4） 分子量：386.42

5） 外觀：固體

6） 純度：≥95%

7） 溶解性：溶于DMF（~10mg/ml）、二氯甲烷（~1mg/ml）、不溶于水

8） 化學結構式：

保存與運輸方法

保存：2-8℃避光干燥保存，至少1年有效。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1） 熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用步驟（僅做參考）

1. 細胞鋪板，培養過夜；

2. DPPP探針的加載：j 低溫保存的DPPP粉末置于室溫平衡至少30min，往瓶內加入無水DMF，配制成25mM的儲存液；k 用細胞培養基或生理緩沖液比如：HHBS，稀釋儲存液到所需的工作濃度，比如：25µM；最佳的工作濃度需設置梯度摸索；l吸走細胞培養基，用PBS清洗一次；加入新鮮配制的DPPP染色工作液；

3. 37℃避光孵育30min。

4. PBS清洗1~2次，去除多余染料；

5. 【可選】脂質過氧化的誘導：用待研究化合物處理細胞或使用陽性對照（比如：AAPH）來誘導脂質過氧化。

6. 熒光測定：用熒光酶標儀、熒光光度計測定熒光值；或用帶合適濾片組（Ex：~351nm，Em：380nm）的熒光顯微鏡做成像分析。

染色示例（來自文獻）

Ref 1）Okimotoa Y, Watanabea A, Nikia E, Yamashitab T, Noguchia N. A novel fluorescent probe diphenyl-1-pyrenylphosphine to follow lipid peroxidation in cell membranes. FEBS Lett. 2000 Jun 2;474(2-3):137-40. doi: 10.1016/s0014-5793(00)01587-8. PMID: 10838073.

實驗目的：顯微觀察DPPP-O的生成。

實驗方法：PMNs（1×106 cells/ml）懸浮于含1% FBS的HBSS溶液中貼壁培養。DPPP溶于DMSO配制成5mM的儲存液，之后加入細胞中使其工作濃度為5uM。避光孵育15min后，用含1% FBS的HBSS清洗去除多余染料。待測樣本置于顯微鏡上，然后加入溶于甲醇的MeLOOH（5uM）。同一視野下監測30min。

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